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我司為您介紹菌種的保藏方法
更新時間:2020-04-23   點擊次數(shù):1859次

上海通蔚生物為您介紹幾種菌種的保藏方法,下列各法可根據(jù)實驗室具體條件與需要選做。
1.斜面低溫保藏法
將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上,待菌充分生長后,棉塞部分用油紙包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏時間依微生物的種類而有不同,霉菌、放線菌及有芽孢的細(xì)菌保存2—4個月,移種一次。酵母菌兩個月,細(xì)菌每月移種一次。
此法為實驗室和工廠菌種室常用的保藏法,優(yōu)點是操作簡單,使用方便,不需特殊設(shè)備,能隨時檢查所保藏的菌株是否死亡、變異與污染雜菌等。缺點是容易變異,因為培養(yǎng)基的物理、化學(xué)特性不是嚴(yán)格恒定的,屢次傳代會使微生物的代謝改變,而影響微生物的性狀;污染雜菌的機(jī)會亦較多。

2.液體石蠟保藏法
(1)將液體石蠟分裝于三角燒瓶內(nèi),塞上棉塞,并用牛皮紙包扎,1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘,然后放在40℃溫箱中,使水汽蒸發(fā)掉,備用。
(2)將需要保藏的菌種,在zui適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng),使得到健壯的菌體或孢子。
(3)用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟,注入已長好菌的斜面上,其用量以高出斜面頂端1cm為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕。
(4)將試管直立,置低溫或室溫下保存(有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間還要長)。
此法實用而效guo好。霉菌、放線菌、芽孢細(xì)菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般無芽孢細(xì)菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌,在37℃溫箱內(nèi),亦可保藏3個月之久。此法的優(yōu)點是制作簡單,不需特殊設(shè)備,且不需經(jīng)常移種。缺點是保存時必須直立放置,所占位置較大,同時也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養(yǎng)物移種后,接種環(huán)在火焰上燒灼時,培養(yǎng)物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺,應(yīng)特別注意。

3.濾紙保藏法
(1)將濾紙剪成0.5×1.2cm的小條,裝入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2張,塞以棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘。
(2)將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng),使充分生長。
(3)取滅菌脫脂牛乳1—2ml滴加在滅菌培養(yǎng)皿或試管內(nèi),取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混勻,制成濃懸液。
(4)用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內(nèi),使其吸飽,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。
(5)將安瓿管放入內(nèi)有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干。
(6)將棉花塞入管內(nèi),用火焰熔封,保存于低溫下。
(7)需要使用菌種,復(fù)活培養(yǎng)時,可將安瓿管口在火焰上燒熱,滴一滴冷水在燒熱的部位,使玻璃破裂,再用鑷子敲掉口端的玻璃,待安瓿管開啟后,取出濾紙,放入液體培養(yǎng)基內(nèi),置溫箱中培養(yǎng)。

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